Sự khác biệt giữa Immunofluorescence và Immunohistochemistry | Immunofluorescence vs Immunohistochemistry

Anonim

Sự khác biệt chính - Immunofluorescence so với Immunohistochemistry

Chẩn đoán bệnh bằng phương pháp sinh học phân tử đã trở thành một lĩnh vực mới nổi của công nghệ phòng thí nghiệm lâm sàng. Nó bao gồm tất cả các xét nghiệm và phương pháp để xác định bệnh và hiểu nguyên nhân của bệnh bằng cách phân tích ADN, RNA hoặc các protein biểu hiện trong cơ thể. Những tiến bộ nhanh trong chẩn đoán phân tử đã cho phép nghiên cứu cơ bản về các bệnh truyền nhiễm và không lây nhiễm. Chúng được sử dụng để xác định sự thay đổi trình tự hoặc mức biểu hiện trong các gen hoặc protein quan trọng liên quan đến bệnh. Immunofluorescence (IF) và Immunohistochemistry (IHC) là hai kỹ thuật được sử dụng rộng rãi trong sinh học ung thư. IF là một loại IHC, trong đó một phương pháp phát hiện huỳnh quang được sử dụng để phân tích các kháng thể đơn dòng và polyclonal, trong khi IHC sử dụng các phương pháp dựa trên hóa học để phát hiện các kháng thể monoclonal và polyclonal. Đây là điểm khác biệt chính giữa IF và IHC.

NỘI DUNG

1. Tổng quan và Chênh lệch khác nhau

2. Immunofluorescence là gì

3. Chế độ miễn dịch cơ thể là gì?

4. Những điểm tương đồng giữa Immunofluorescence và Immunohistochemistry

5. So sánh từng bên - Immunofluorescence vs Immunohistochemistry ở dạng dạng bảng

6. Tóm tắt

Immunofluorescence (IF) là gì?

Immunofluorescence là kỹ thuật phát hiện các kháng thể sử dụng trong bài kiểm tra được dán nhãn bằng thuốc nhuộm huỳnh quang hoặc các protein huỳnh quang để phát hiện. Các kháng thể thứ cấp gắn nhãn có thể dẫn đến các tín hiệu nền không mong muốn; do đó, IF kỹ thuật dựa trên việc gắn nhãn bản thân kháng thể chính hiện nay để tránh các tín hiệu không mong muốn trong quá trình phát hiện. Thông qua kỹ thuật này, sự ngăn cản không đặc hiệu giữa kháng nguyên tiểu học và trung học được ngăn ngừa, và nó nhanh hơn vì không có bước ủ thứ phát liên quan. Chất lượng dữ liệu cũng được cải thiện.

Hình 1: Nhuộm miễn dịch huỳnh quang đôi cho BrdU, NeuN và GFAP

Fluorochromes hoặc thuốc nhuộm huỳnh quang là các hợp chất có thể hấp thụ bức xạ, tốt hơn là bức xạ cực tím bị kích thích. Khi các hạt đi tới trạng thái nền từ trạng thái kích thích, chúng phát ra bức xạ được bắt và phát hiện bởi một máy dò để tạo thành một quang phổ.Điều rất quan trọng là nhãn huỳnh quang tương thích và ổn định cho phản ứng cụ thể và cần được liên hợp đúng với kháng thể để có được kết quả chính xác. Một trong những fluorochromes được sử dụng nhiều nhất là isothiocyanate fluorescein (FITC), có màu xanh lá cây, có bước sóng đỉnh hấp thụ và phát xạ cực đại lần lượt là 490 nm và 520 nm. Rhodamine, một chất khác được sử dụng trong IF, có màu đỏ và có bước sóng đỉnh hấp thụ và phát xạ khác nhau là 553 nm và 627 nm.

Cơ chế miễn dịch (IHC) là gì? IHC là một phương pháp thử phân tử được thực hiện để xác định và xác nhận sự tồn tại của kháng nguyên trong tế bào đích. Tế bào đích có thể là một hạt nhiễm khuẩn, một mầm bệnh vi khuẩn hoặc một tế bào khối u ác tính. IHC sử dụng các kháng thể monoclonal và polyclonal để xác định sự có mặt của các kháng nguyên hiện diện trên bề mặt tế bào của các tế bào đích. Kỹ thuật này dựa trên kháng thể kháng nguyên kháng thể. Một marker phát hiện được liên hợp với các kháng thể này để phát hiện sự có mặt hoặc không có kháng nguyên cụ thể. Những dấu hiệu này có thể là các dấu hiệu hóa học như enzyme, các kháng thể gắn thẻ huỳnh quang hoặc các kháng thể có dán nhãn radio. <2> Hình 2: Chuột chuột bị nhuộm màu bởi mô miễn dịch (immunoscience)

Việc sử dụng IHC phổ biến nhất là trong sinh học tế bào ung thư để xác định sự hiện diện của khối u ác tính, nhưng nó cũng được sử dụng để phát hiện các bệnh truyền nhiễm.

Những điểm tương đồng giữa Immunofluorescence và Immunohistochemistry là gì?

Immunofluorescence và Immunohistochemistry diễn ra dưới điều kiện in vitro.

Cả hai kỹ thuật đều dựa trên kháng nguyên kháng nguyên-> Cả hai đều là các kỹ thuật rất nhanh.

Kết quả của các kỹ thuật này có thể tái sản xuất được.

  • Cả hai đều có chất lượng dữ liệu được cải thiện.
  • Những kỹ thuật này được sử dụng trong chẩn đoán ung thư và các bệnh truyền nhiễm.
  • Sự khác biệt giữa Immunofluorescence và Immunohistochemistry là gì?
  • - Điều khác biệt trước khi Bảng ->
  • Immunofluorescence vs Immunohistochemistry
  • IF là một kỹ thuật phát hiện nơi các kháng thể sử dụng trong bài kiểm tra được dán nhãn bằng thuốc nhuộm huỳnh quang hoặc các protein huỳnh quang để phát hiện. IHC là một kỹ thuật phát hiện, trong đó các kháng thể được sử dụng trong bài kiểm tra được dán nhãn bằng hóa chất hoặc các nguyên tố phóng xạ để phát hiện.

Độ chính xác

Độ chính xác cao hơn trong kỹ thuật IF so với IHC.

Độ chính xác thấp hơn IHC.

Độ đặc hiệu NẾU cụ thể hơn.
IHC ít cụ thể. Các cơ chế phân tử đã mang lại nhiều thay đổi trong lĩnh vực y học, làm tăng các phương pháp xét nghiệm phân tử tiên tiến mang lại những cuộc cách mạng trong lĩnh vực chẩn đoán. Những phát minh này đã dẫn đến một nhận dạng nhanh chóng và chính xác và xác nhận của bệnh, do đó cho phép quản lý thành công và sản xuất thuốc. Những kỹ thuật này cũng được sử dụng trong dược lý để tìm ra các mục tiêu của thuốc và để khẳng định các đặc tính dược động học của thuốc trong quá trình trao đổi chất ma túy.IF và IHC là hai phương pháp chẩn đoán dựa trên khái niệm kháng nguyên và kháng thể, mặc dù phương thức phát hiện ở cả hai kỹ thuật khác nhau. IF sử dụng nguyên lý phát huỳnh quang để phát hiện kháng nguyên và IHC sử dụng khái niệm liên hợp hóa học để phát hiện kháng nguyên. Đây là sự khác biệt giữa IF và IHC.
Tải về bản PDF của Immunofluorescence vs Immunohistochemistry Bạn có thể tải về phiên bản PDF của bài viết này và sử dụng nó cho các mục đích ngoại tuyến như một trích dẫn. Vui lòng tải xuống phiên bản PDF ở đây Sự Khác biệt giữa Immunofluorescence và Immunohistochemistry.
Tài liệu tham khảo:
1. Aoki, Valéria, et al. "Miễn dịch huỳnh quang trực tiếp và gián tiếp. "Anais Brasileiros de Dermatologia, SociedadeBrasileira de Dermatologia, Có ở đây. Truy cập vào 25 tháng 8 năm 2017. 2. Duraiyan, Jeyapradha, et al. "Ứng dụng của hệ miễn dịch học. "Tạp chí Khoa học Dược và Khoa học Sinh học, Công ty Medknow Publications & Media Pvt Ltd, tháng 8 năm 2012, Có tại đây. Đã truy cập vào 25 tháng 8 năm 2017.

Hình ảnh được phép bởi:

1. "Nhiễm huỳnh quang miễn dịch đôi cho BrdU, NeuN và GFAP" của Ma M, Ma Y, Yi X, Guo R, Zhu W, Fan X, Xu G, Frey WH 2, Liu X. - Sự chuyển đổi nội tại của chuyển đổi yếu tố tăng trưởng beta1 chuột sau đột qu reduces làm giảm khối lượng nhồi máu và làm tăng neurogenesis ở vùng dưới; PMID 19077183 (CC BY 2. 0) thông qua Commons Wikimedia

2. "Hypothalamus của một mô chuột được nhuộm bởi ABC-Immunohistochemistry" By zabbn - Tác phẩm của chính mình (CC BY-SA 3. 0) thông qua Commons Wikimedia