Chuyển đổi so với transfection | Khác biệt giữa chuyển đổi và chuyển nạp

Anonim

Chuyển đổi và transfection Chuyển đổi và transfection là hai kỹ thuật đơn giản được sử dụng để giới thiệu một gen nước ngoài vào một tế bào chủ. Tuy nhiên, các kỹ thuật này phụ thuộc vào loại máy chủ hoặc hệ thống vector.

Chuyển đổi tế bào là gì?

Chuyển đổi là kỹ thuật được sử dụng để đưa gien vào men và tế bào vi khuẩn. Kỹ thuật này thường gây ra sự thay đổi di truyền trong gen, và do đó biểu hiện của gen là vĩnh viễn. Sự chuyển đổi vi khuẩn lần đầu tiên được Frederick Griffith giới thiệu vào năm 1928. Sau đó, vào đầu những năm 1970, kỹ thuật này được sử dụng trong

E. coli

. Trong quá trình chuyển đổi E. coli, các tế bào được ngâm trong dung dịch nước đá lạnh của CaCl 2. Bước này làm cho E. coli tế bào có thẩm quyền. Sau đó, các tế bào có thẩm quyền được trộn với DNA plasmid và được ủ trong băng trong 20-30 phút. Sau đó, một cú sốc nhiệt ngắn được đưa ra để cho phép chuyển DNA vào tế bào. Cuối cùng, các tế bào được đặt trong một môi trường dinh dưỡng và ủ ở 37 ° C trong 60-90 phút để thiết lập các plasmid. Một khi những bước này được hoàn thành thành công, các tế bào chuyển đổi có thể được đặt trên một môi trường thích hợp để nhân giống các tế bào. Vì, chuyển đổi được coi là một kỹ thuật không hiệu quả, nó không thể được sử dụng để chuẩn bị các ngân hàng nhân bản. Truyền máu là gì?

Transfection là một phương pháp giới thiệu một gen ngoại lai, thông thường, vào tế bào động vật có vú. Có hai phương pháp truyền máu; cụ thể là, transfection thoáng qua và transfection ổn định. Trong quá trình transfection thoáng qua, biểu hiện gen có sẵn trong một thời gian giới hạn; do đó sự thay đổi gen gây ra biểu hiện tạm thời. Phương pháp truyền máu đơn giản và nhanh chóng; do đó nó có thể được sử dụng thường xuyên. Một nhược điểm của transfection thoáng qua là khó khăn trong việc áp dụng cho các hệ thống tổng hợp protein quy mô lớn.

Trong quá trình truyền máu ổn định, một gen mục tiêu được tích hợp vào bộ gen của tế bào chủ, và do đó biểu hiện gen là vĩnh viễn, không giống như sự thoáng qua transfection.

Sự khác biệt giữa chuyển đổi và chuyển đổi là gì?

• Chuyển đổi là sự đưa vào gen vào tế bào prokaryote (vi khuẩn và nấm men), trong khi transfection thường được gọi là sự đưa gen vào tế bào động vật có vú.

Kết quả chuyển đổi trong sự biến đổi di truyền, trong gen, trong khi transfection có thể dẫn đến sự biểu hiện tạm thời hoặc sự thay đổi vĩnh viễn của gen.