Sự khác biệt giữa SDS Page và Western Blot | SDS Page so với Western Blot

Sự khác biệt chính - SDS Page vs Western Blot

Western blotting là kỹ thuật phát hiện một protein cụ thể từ một mẫu protein. Kỹ thuật này được thực hiện thông qua một số bước chính: gel electrophoresis, blotting, và lai. Điện di gel polyacrylamide natri sodendyl sulfate (SDS Page) là một kỹ thuật điện di gel được sử dụng để tách protein theo kích cỡ của chúng (trọng lượng phân tử). Western blot là một tấm đặc biệt của một màng bám được sử dụng để chuyển các mô hình giống nhau của các protein trong trang SDS. Sự khác biệt chính giữa SDS Page và western blot là trang SDS cho phép tách các protein trong một hỗn hợp trong khi Western blot cho phép phát hiện và định lượng một protein cụ thể từ một hỗn hợp. Cả hai đều hữu ích trong các nghiên cứu phân tích protein. NỘI DUNG

1. Tổng quan và Chênh lệch khác nhau

2. Trang SDS là gì

3. Western Blot là gì

4. So sánh từng bên - Trang SDS và Western Blot

5. Tóm tắt

Trang SDS là gì?

SDS Page là một kỹ thuật điện di gel được sử dụng để tách protein. Nó thường được sử dụng trong sinh hóa học, di truyền học, pháp y và sinh học phân tử. Một khi protein được chiết xuất từ ​​mẫu, chúng được chạy trên một gel tạo thành SDS và polyacrylamide. SDS là chất tẩy anion được sử dụng để tuyến tính các protein (các protein phân hủy) và truyền tải một điện tích âm cho các protein tuyến tính tỷ lệ với khối lượng phân tử của chúng. Polyacrylamide trở thành chất rắn hỗ trợ cho gel. Các protein bị biến đổi có tính tích điện âm di chuyển về phía đầu dương của bộ máy qua gel. Theo kích cỡ của protein, tốc độ di chuyển khác nhau giữa các protein và sự phân tách xảy ra. Do đó, trang SDS rất hữu ích cho việc tách các protein riêng lẻ dựa trên kích cỡ của chúng.

Sự chuẩn bị của gel polyacrylamide cho sự phân đoạn của protein là một bước quan trọng trong SDS Page. Nồng độ chính xác của polyacrylamide và loại chất liên kết chéo được sử dụng ảnh hưởng mạnh đến các đặc tính vật lý của gel, làm cho việc tách thực tế các protein khác nhau. Kích cỡ lỗ của gel nên được quản lý đúng cách để tách hiệu quả. Tuy nhiên, SDS Page được xem như một kỹ thuật tách protein có độ phân giải cao.

Kỹ thuật SDS Page có một giới hạn lớn trong phân tích protein. Vì SDS làm biến tính protein trước khi tách, nó không cho phép phát hiện hoạt động enzym, tương tác liên kết protein, các đồng tử protein, vv

Hình 1: Trang SDS

Western Blot là gì?

Kỹ thuật thấm nước Western blotting cho phép phát hiện một protein cụ thể từ hỗn hợp protein và đo lượng và trọng lượng phân tử của protein. Western blot là màng được sử dụng trong quá trình thấm để có được hình ảnh gương của các mẫu protein trong gel SDS-polyacrylamide. Màng được sử dụng cho phương pháp thẩm thấu ở phía Tây chủ yếu được làm từ nitrocellulose hoặc polyvinylidene difluoride (PVDF). Màng với protein chuyển có thể được sử dụng để xác định protein mong muốn. Nó đòi hỏi chất kháng thể có chất lượng cao để phát hiện các protein mong muốn bằng cách lai. Kháng thể liên kết với kháng nguyên cụ thể của nó và cho thấy sự hiện diện của kháng nguyên mong muốn đó là một protein.

Việc chuyển các protein từ gel polyacrylamide SDS sang phương pháp western blot được thực hiện bằng electroblotting. Đây là một phương pháp hiệu quả và nhanh chóng, làm cho các protein này tự di chuyển gel ra khỏi gel và truyền qua màng nitrocellulose (western blot).

Hình 2: Western Blot

Sự khác nhau giữa SDS Page và Western Blot là gì?

- khác Điều Trung trước Bảng ->

Trang SDS so với Western Blot

SDS Trang là một kỹ thuật điện di gel.

Western blot là một kỹ thuật được thực hiện trên một màng tế bào để phát hiện một protein cụ thể từ một hỗn hợp.
Sử dụng	trang SDS cho phép tách protein theo kích cỡ của chúng.
Western blot cho phép chuyển các protein trên gel trang SDS mà không thay đổi mô hình và cho phép lai với các kháng thể cụ thể.
Nhược điểm	Sự biến tính protein, chi phí cao và sự có mặt của các hóa chất gây độc thần kinh là những bất lợi của kỹ thuật này.
Kỹ thuật này tốn nhiều thời gian và cần có một điều kiện kiểm soát cá nhân và điều kiện cụ thể tốt.
Tóm tắt - SDS Page và Western Blot	Trang SDS và Western blot là hai phương pháp liên quan đến phân tích protein. Trang SDS cho phép dễ dàng tách các protein trên gel theo trọng lượng phân tử của chúng. Western blot giúp xác nhận sự hiện diện và số lượng của một protein cụ thể thông qua việc lai với các kháng thể cụ thể. Đây là sự khác biệt giữa SDS Page và western blot.

Tài liệu tham khảo:

1. Blancher, C., và A. Jones. "SDS -PAGE và kỹ thuật thấm nước ở phương Tây. "Phương pháp trong y học phân tử. U. S. Thư viện Y khoa Quốc gia, n. d. Web. 27 tháng 3 năm 2017

2. Nowakowski, Andrew B., William J. Wobig, và David H. Petering. "SDS-PAGE tự nhiên: Sự tách biệt điện phân độ phân giải cao với sự duy trì các tính chất bản địa bao gồm các ion kim loại bị giới hạn. "Metallomics: tích hợp khoa học sinh trắc học. U. S. Thư viện Y khoa Quốc gia, tháng 5 năm 2014. Web. 27 tháng 3 năm 2017.

Hình ảnh được phép của:

1. "SDS-PAGE Electrophoresis" của Bensaccount tại Wikipedia tiếng Anh (CC BY 3. 0) thông qua Commons Wikimedia

2. "Western blot 114A" của Amanthabagdon - Tác phẩm của chính mình (Public Domain) qua Commons Wikimedia